TÉCNICA DEL NORTHERN BLOT EN LA DIABETES MELLITUS

Gracias a las nuevas tecnologías como la Northern Blot, se identificaron cuatro genes mitocondriales codificados diferentes que fueron aumentados en la expresión en la diabetes: citocromo oxidasa I, III citocromo oxidasa, NADH deshidrogenasa IV, y 12S rRNA, todos los cuales se encuentran en la cadena pesada del genoma mitocondrial. Hubo un aumento de 1,5 a 2,2 veces en la expresión de estas moléculas de ARNm en relación con el total de ARN tanto en tipo I y diabetes tipo II según la evaluación de los análisis de transferencia de Northern blot. El aumento de la expresión del gen mitocondrial puede contribuir al aumento de la respiración mitocondrial observada en diabetes no controlada.

Bibliografía:

• http://www.conganat.org/seap/revista/v30-n3/13.pdf
• http://www.seap.es/c/document_library/get_file?uuid=dd48aeb8-9e38-4541-bcfb-d75fd6b2ee9f
• http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC441479/

ANÁLISIS ARTICULO CIENTÍFICO CON TÉCNICA DE PCR EN DIABÉTICOS

Tema: Efectividad de la metformina en pacientes con diabetes tipo II según variantes en el gen SLC22A1.

Objetivo: 

• Determinar la efectividad de la metformina como fármaco ideal para los pacientes que padecen diabetes tipo II según las variantes presentes en el gen SLC22A1.

Tipo de muestra:

Sangre venosa periférica. 

Tipo de ácido nucleico:

ADN genómico.

Extracción de ADN:

Kit comercial Wizard Genomic DNA Purification Kit (Promega, Madison, EE.UU.)

• Lisis
• Separación         
• Purificación

PCR-RFLP (PCR-restriction fragment length polymorphism assay):

                                                                               T°             Tiempo

• Desnaturalización inicial                      94°          2 min
• Desnaturalización                               94°          50 segundos
• Apareamiento                                    58°          50 segundos      (35 ciclos)
• Polimerización                                   72°          60 segundos
• Polimerización final                            72°          5 min

Visualización:

Electroforesis.

Bibliografía:

• http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572014000200008

PRUEBA DE TAMIZAJE Y CONFIRMATORIA DE LA DIABETES MELLITUS

En un inicio esta enfermedad no presenta síntomas muy marcados, siendo de mucha importancia diagnosticarlo a tiempo. Para ello en la actualidad existen medios diagnóstico como:

•  Prueba de tamizaje o screening:

Examen de glucemia en sangre: por medio de aparatos como glucómetro nos permite medir la glucosa en sangre. Valores en ayuno. Normales: 70-100 mg/dl. Pre-diabetes: 101-125 mg/dl. Diabetes: > o = a 126 mg/dl.  

 

• Prueba confirmatoria:

Hemoglobina glicada (Hb1Ac): esta prueba es una de las más exactas al momento del diagnóstico y control de la diabetes. Valores. Normal: < o = a 5.7%. Pre-diabetes: 5.7% - 6.4%. Diabetes: > o = a 6.5%.

Examen de glucemia en sangre.

Hemoglobina glicada (Hb1Ac)

Bibliografía:

• http://www.who.int/diabetes/action_online/basics/es/index1.html
• http://www.mspbs.gov.py/rs-12/wp-content/uploads/2013/12/diabetes1.pdf
• http://www.revistaalad.com/website/articulo.asp?id=13&pagina=2
• http://www.bd.com/mexico/diabetes/main.aspx?cat=3258&id=3279

ALTERACIONES DE LA TRADUCCIÓN EN LA DIABETES MELLITUS

Es de gran importancia saber que la producción de insulina va a ser la afectada en anomalías de la tracción de esta misma hormona. Se conoce que por medio de un ARNm este es traducido en el retículo endoplasmático rugoso en preproinsulina. En los últimos años se a descubierto un tipo de ARN que se lo relaciona con la diabetes mellitus como es el ARNInc. Su función aun se desconoce pero se sabe que se presenta en varios tejidos. También se lo asocia  con cáncer, ciclo celular, el ensamblado de los ARNs o la regulación transcripcional.

Bibliografía:

• http://dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/4788212.pdf
• http://blog.hospitalclinic.org/es/2012/10/nou-tipus-arn-relacionat-amb-diabetis/

ALTERACIONES EN LA TRANSCRIPCIÓN DE EN LA DIABETES MELLITUS

En la diabetes mellitus tipo, se puede encontrar ciertas alteraciones en los factores de de transcripción en los hepatocitos (hepatonuclear), los cuales cumplen un papel determinante en el desarrollo y proliferación de las células beta pancreáticas, así como su metabolismo funcional cuando estas llegan a la madurez. En los estudios recientes se puede observar mutaciones en genes que codifican las enzimas como la glucocinasa por ende existe una baja producción de insulina. Entre los factores de transcripción que regulan la transcripción del gen de la insulina a ARNm tenemos: factor promotor de insulina 1 (IPF-1) y los genes HFN-1 alfa, 4 alfa y 1 beta que se expresan en el hígado y en los islotes. 

Bibliografía.-

• http://www.revistanefrologia.com/revistas/P5-E522/P5-E522-S2979-A10918.pdf
• http://themedicalbiochemistrypage.org/es/diabetes-sp.php

ALTERACIONES EPIGENÓMICAS EN LA DIABETES MELLITUS

Los efectos epigenéticos son cambios heredables en la estructura del ácido desoxirribonucleico (ADN) que no modifican la secuencia de bases nitrogenadas. Un fenómeno epigenético bien documentado en seres humanos se observa en las células germinales, donde regiones regulatorias de ciertos genes son metiladas y expresadas diferencialmente en dependencia de si el gen es heredado de la madre o del padre. Esta impregnación impacta en genes involucrados en los casos de una forma neonatal transitoria rara de diabetes y en algunos sujetos con diabetes tipo 1 y 2 poligenética. Los efectos del parentesco, además de los estímulos ambientales, pueden incluir la herencia materna del genoma mitocondrial y los efectos maternos sobre el medio intrauterino.

BIBLIOGRAFÍA.-

• http://www.medigraphic.com/pdfs/correo/ccm-2012/ccm123i.pdf
• http://soched.cl/Revista%20Soched/1_2013/1-2013.pdf#page=17